MITOSIS

PRACTICA DE LABORATORIO N°8

MITOSIS

OBJETIVOS

• Identificar los principales cambios morfológicos que se presentan durante la profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis en células meristématicas de raíces de cebolla 

• Evaluar la importancia de la división celular en el desarrollo, el crecimiento y la reposición de células en tejidos desgastados 

• Identificar mediante observación microscópica las diferentes fases de la mitosis en raíz de cebolla.

MARCO TEORICO

Todos los seres vivos, uni y pluricelulares tienen como misión fundamental la de reproducirse preservando sus características esenciales a través de las generaciones.  Los fenómenos que tienen lugar durante la reproducción celular corresponden a una de las etapas del proceso conocido como ciclo celular. Este ciclo resulta de la coordinación de una serie de procesos que involucran la integración de diferentes señales que conducen a la duplicación de DNA, su condensación, segregación y posterior descondensación. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la cual una célula da origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas. Aunque la mitosis, de por sí es un proceso continuo, para su estudio se divide en diferentes etapas consecutivas de acuerdo a los cambios morfológicos que va experimentando la célula y que se continúan con la citocinesis

MATERIALES Y METODOS

•  Microscopio
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Lanceta estéril
• Cubeta de tinción
• Aguja enmangada
• Pinzas
• Palillos
• Frasco lavador
• Mechero
• Tijeras
• Papel de filtro
• Vaso de precipitados
• Vidrio de reloj
• Orceína A
• Orceína B
• Eosina
• Cebolla

Cinco o seis días antes de comenzar los experimentos, escoja un bulbo de cebolla fresca y elimine mediante un raspado con una cuchilla, las raíces secas que se hallan en la base del bulbo. En un frasco boca ancha o un vaso desechable coloque la cebolla como aparece en la figura. Vierta agua en el frasco, hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de la cebolla húmeda y cambie el agua diariamente.

• Cuando las raíces nuevas alcancen 3 cm. Aproximadamente de longitud, extraiga la cebolla del recipiente y corte el último centímetro de la punta.

• Cortar con las tijeras unos 2-3 mm de los extremos de las raicillas y depositarlo en un vidrio de reloj en el que se han vertido 2-3 ml de orceína A.

• Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 8 minutos, evitando la ebullición, hasta la emisión de vapores tenues.

• Con las pinzas tomar uno de los ápices o extremos de las raicillas y colocarla sobre un portaobjetos, añadir una gota de orceína B y dejar actuar durante 1 minuto

• Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que la raíz quede extendida.

·    Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las figuras mitóticas, y posteriormente se pasa a un objetivo de mayor aumento para discriminar detalles.


NOTA: El procedimiento anterior puede modificarse de la siguiente forma:  Una vez cortadas las raíces, esta se colocan en una lamina portaobjetos. luego se adiciona una gota de colorante aceto orceina o eosina. Posteriormente de coloca el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz y se observa al microscopio. 

La orceína A reblandece las membranas celulares y la B completa el proceso de tinción. Con la presión sobre el porta de la preparación se logra una extensión y difusión de las células del meristemo de la cebolla. La preparación presenta el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que abarca el microscopio. Se observan células en diversas fases o estados de división celular. Se ven los cromosomas teñidos de morado por la orceína. El aspecto reticulado así como el mayor tamaño de algunos núcleos corresponde a las células que se encontraban en los procesos iniciales de la división mitótica.


ANEXOS
http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_mitosis1.htm
http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_mitosis2.htm


BIBILIOGRAFIA

http://www.unicartagena.edu.co/librose/LABORATORIO%20No%209.%20MITOSIS.pdf

http://www.joseacortes.com/practicas/mitosis.htm